Obtention d’une gélose dans une boite de Pétri

 

1. organiser votre plan de travail pour manipuler proprement et en suivant les consignes de sécurité ;

2. peser dans la coupelle 0,2g d’agar prélevés à l’aide de la spatule ;

3. Verser 14 mL d’eau distillée puis l’agar dans le Bécher et dissoudre soigneusement l’agar avec la spatule ;

4. chauffer le mélange en remuant à la spatule jusqu’à ce que le mélange devienne limpide et arrêter au tout

début de l’ébullition ;

5. retirer à l’aide de la pince en bois, attendre quelques secondes que le Bécher refroidisse afin de pouvoir

saisir le flacon sans se brûler ;

6. verser 5mL d’agar chaud dans la boîte de Pétri ;

7. égaliser le niveau et supprimer rapidement les bulles ;

8. laisser la boite refroidir sans mettre le couvercle ;

9. rincer le matériel ;

10. ne pas remuer les boîtes avant prise du gel d’agar : environ 5 mn.

 

Préparation du test

1. utiliser le gabarit de perçage pour creuser à l’aide du tube emporte pièce les puits nécessaires dans le gel d’agar ; 2. éliminer les disques de gel avec le cure-dent si nécessaire.

Réalisation des dépôts

 

Proposer une disposition logique de vos dépôts sachant que vous avez à votre disposition (ordre alphabétique) :

1. du sérum d'un lapin immunisé contre la SAB
2. du sérum de bœuf (contient le sérum albumine de bœuf)
3. du sérum de cheval (contient le sérum albumine de cheval),
4. du sérum de chèvre (contient le sérum albumine de chèvre)
5. du sérum de lapin (contient le sérum albumine de lapin)
6. du sérum de porc (contient le sérum albumine de porc)
7. une solution de SAB purifiée

 

* La SAB (Sérum Albumine Bovine) est une des protéines du sérum de bœuf

 

 

1. marquer sur la boîte de Pétri la disposition des produits à déposer dans les puits permettant de révéler la réaction de l’anticorps étudié avec les différents antigènes proposés.

2. remplir les différents puits avec μL ou gouttes : chaque produit devra être prélevé avec un compte goutte propre ou une micropipette à embout propre, puis être déposé dans les puits sans endommager le gel d’agar.

Le dépôt ne doit pas débordé, ni contenir de bulles et il doit être suffisant pour être en contact avec la gélose où il va diffuser.

3. fermer la boite ;

4. observer les résultats fournis sur fond noir et en éclairage rasant.

Date de création : 03/02/2013 - 12:56
Dernière modification : 31/01/2017 - 16:57
Catégorie : terminales 2ACh2
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